BMB514: Immunologiske teknikker (5 ECTS)

STADS: 01001401

Niveau
Bachelorkursus

Undervisningsperiode
Kurset er placeret i efterårssemesteret.

Ansvarlige undervisere
Email: SHansen@health.sdu.dk

Yderligere undervisere
ckoch@health.sdu.dk

Skemaoplysninger
Vis hele skemaet
Vis personligt skema for dette kursus.

Indgangskrav:
Ingen

Faglige forudsætninger:
BMB512 Teoretisk immunologi skal være fulgt.

Formål
At give den studerende praktisk erfaring med immunologiske teknikker og fremstilling og karakterisering af immunreaktanter, samt en erkendelse af disse metoders store potentiale i den biologiske forskning og udvikling.

Målbeskrivelse
Når kurset er færdigt, forventes den studerende at kunne:

• opnå en bedre forståelse af den teoretiske immunologi baseret på at “have haft immunsystemet i hænderne”
• fremstille, oprense og karakterisere antistoffer fremstillet i f.eks. kaniner eller mus
• anvende antistoffer til kvalitative og kvantitative analyser.
• opstille, optimere og validere immunologiske assays
• bestemme kvalitative parametre som antigen-specificitet, epitopspecificitet, affinitet og involvering af typer af bindinger i reaktionen mellem antigen og antistof
• arbejde med cellekulturer under fremstilling og karakterisering af monoklonale antistoffer
• arbejde efter forskrifterne i et sterillaboratorium
• vurdere resultater af analyser, baseret på brugen af immunologiske reagenser

Indhold
I. Fremstilling af monoklonale antistoffer omfattende immunisering, fusion, udvælgelse, kloning og definition af specificitet.

II. Analyse af polyklonale antistoffer, oprensning af IgG, analyse af renhed og specificitet og fremstilling af monospecifikke præparationer ud fra polyspecifikke antisera.

III. Kvantitative immunologiske teknikker med speciel focus på ”sandwich” format i form af Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Omkring ELISA erhverves kompetencer til udvikling og opsætning, kvantificering af et antigen i forskellige biologiske væsker og betydningen interfererende faktorer som heterofile anti-Ig antistoffer og humane anti-dyre IgG antistoffer. Også kvantitativ radio-immuno-assay (RIA) samt kvantitative immunelektroforetiske og immundiffusionsteknikker udføres.

IV. Analytiske immunologiske teknikker. I forbindelse med fremstilling af monoklonale antistoffer lærer de studerende opsætning og applikation af analytisk ELISA til identifikation af relevante hybridomer og til overvågning af kloning. De studerende indføres i brug af analytiske immunelektroforetiske teknikker til undersøgelse af polyklonale antistoffers specificitet og overvågning af et kromatografisk forløb. De studerende analyserer begreberne immunologisk identitet, non-identitet og krydsreaktion med dobbelt immundifferentionsteknik.
Western blot udføres i relation til identifikation af specifikke antigener i en biologisk væske og undersøgelse af de applicerede antistoffers specificitet. Under ELISA-øvelserne erhverves kendskab til ny teknologi til definition af den relative epitopspecificitet af monoklonale antistoffer.

V. Under kursus lærer de studerende brug af fluorokrom-mærkede antistoffer i FACS-analyse til identifikation af specifikke celletyper og kvantificering af receptorer på disse celler. Desuden oplæres de studerende i immunhistokemisk undersøgelse af antigeners vævslokalisation med brug af enzymmærkede antistoffer.

VI. De studerende indlærer immunpræcipitation, isolering og karakterisering ved brug af specifikke antistoffer på radioaktivt mærkede proteinblandinger i kombination med SDS-PAGE og autoradiografi. Introduktion til immunagglutination erhverves ved øvelser centreret om AB0 blodtypesystemet.

Litteratur

• Øvelsesvejledning til kurset .

Kursets hjemmeside
Dette kursus benytter e-learn (blackboard).

Forudsætningsprøver
Ingen

Eksamen- og censurform:

1. Kurset evalueres med en rapport, bestået/ikke-bestået, intern censur ved underviser. (5 ECTS). (01001402).

Vejledende timetal
På naturvidenskab er undervisningen tilrettelagt efter trefasemodellen dvs. intro, trænings- og studiefasen.

Laboratorieøvelser (10 kursusdage med hver 6 timer, ialt 60 timer).
Aktiviteter i studiefasen

Undervisningsform
Laboratorieøvelser (10 kursusdage med hver 6 timer, ialt 60 timer).

Sprog
Dette kursus undervises på dansk.

Bemærkninger
Kursusmanual på 130 sider bestående af en skematisk fremstilling af de overordnede temaer, en indholdsfortegnelse, et detaljeret kursusprogram der i farvekoder henviser til de skematiske fremstillinger samt selve manualen bestående af 13 kapitler med en teoretisk introduktion og detaljeret beskrivelse af de enkelte øvelser.

Kursustilmelding
Se tilmeldingsfrister.

Pris for åben uddannelse
Se priser for enkeltkurser.

Denne kursusbeskrivelse var gyldig fra 1. september 2013 til 31. august 2018.